Салмова М.А.   Шестибратов К.А.   Шадрина Т.А.  

Скорость роста и устойчивость к гербицидам трансгенных форм березы с генами

Докладчик: Салмова М.А.

Создание новых форм лесных пород для плантационного ведения лесного хозяйства с помощью традиционных методов селекции – очень длительный процесс. Получить линии с увеличенными темпами роста и с повышенной устойчивостью к гербицидам в более короткие сроки можно с помощью генетической трансформации.
Для создания новых линий проведен ряд агробактериальных трансформаций генами глутаминсинтетазы сосны gs1 и фосфинотрицинацетилтрансферазы bar. В экспериментах по генетической трансформации использованы генотипы Betula pubescens бп3f1 и бп4а. Для проведения агробактериального переноса использован супервирулентный штамм СВЕ21. Использовались бинарные вектора pGS с геном gs1 и pBIBar с геном bar под контролем 35S промотора. Присутствие генов было подтверждено методом ПЦР у 35 линий (gs1) и 10 линий (bar). Полученные линии использовали для проведения испытаний в защищенном грунте с целью оценки фенотипических проявлений рекомбинантных генов.
Эксперимент по оценке устойчивости линий к фосфинотрицину (РРТ) провели в конце первого сезона выращивания в условиях защищенного грунта. На листья растений наносили препараты PPT в концентрациях от 0 до 30 мг/л методом точечных аппликаций (объем раствора для аппликации – 6 мкл; диаметр точки 5,5 мм). Воздействие препарата продолжалось в течение 7 суток. После этого проводили оценку наличия поражений. В качестве контроля использовали растения базовых генотипов. Из всех линий на основе генотипа бп3f1 выявлены 3, обладающие большей устойчивостью к воздействию РРТ в использованном диапазоне концентраций по сравнению с контролем. Две линии (F38BAR3c, F38BAR3d, несут ген bar) показали значительную устойчивость к действию фосфинотрицина. На листьях этих растений полностью отсутствовали признаки поражения. У третьей линии (F14GS9a, с геном gs1) симптомы поражения были менее выраженными, чем в контроле. Из трансгенных линий, полученных на основе генотипа бп4а, были протестированы только содержащие ген gs1. Ни одна из них не обладает повышенной устойчивостью к данному гербициду, по отношению к контрольным растениям.
Оценку основных ростовых показателей проводили на растениях, выращиваемых в течение двух сезонов в условиях защищенного грунта. Для этого использовались такие биометрические показатели, как высота стебля, суммарный годовой прирост и диаметр корневой шейки. По совокупности показателей все линии разделены на три группы – карлики (линии с замедленными темпами роста), линии с нормальным ростом и линии с ускоренными темпами роста. Из последней группы были выбраны 4 линии с максимальными ростовыми характеристиками. Так, линии F14GS23b и F14GS23c превышают показатели базового генотипа (бп3f1) по средней высоте стебля на 20 – 45%, по суммарному годовому приросту на 34 – 50%, по диаметру корневой шейки на 20%. У линий P9GS10c и P9GS11c превышение значений (относительно контроля бп4а) достигает 25%, 85 – 95% и 15 – 20% по каждому показателю соответственно.
В результате, из всех полученных трансгенных линий выделено 7 наиболее перспективных. Запланированы дальнейшие испытания выбранных клонов. По их результатам некоторые из этих клонов могут быть рекомендованы для создания быстрорастущих лесных плантаций.

 

Файл тезисов: Салмова.doc


К списку докладов